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基因扩增PCR污染的预防与控制

更新日期:2019年6月25日 大字 小字
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基因扩增PCR污染的预防与控制
   基因扩增PCR实验室设计的核心问题是如何避免污染。在实际工作中,常见的有以下几种污染类型:扩增产物的污染;天然基因组DNA的污染;试剂的污染以及标本间的污染。由于一旦发生污染,实验就须停止,直到找到污染源为止,而且实验结果须作废,需重新进行实验。所以发生污染后再围绕实验室来寻找污染源不但耗时而且繁琐,浪费人力物力。因此要避免污染,应是预防,而不是排除。

1.工作区域的严格划分
    (1)各个实验区域设置合理;
    (2)各个实验区域要有明显的标记(如醒目的门牌或不同的地面颜色等),以避免各个不同实验区域设备物品、试剂等发生混淆。

2.合理的系统设置
    (1)合理的空调通风系统设置,尽量采用全送全排的空调系统;
    (2)严格的气流压力控制,保证不同的实验区内不同的压力要求。

3.规范的操作
    (1)临床基因扩增PCR检验实验室的技术人员须进行上岗培训,经培训合格后才能从事临床基因扩增检验的工作;
    (2)在实验操作过程中,操作者须戴手套,并经常更换。此外,操作中使用一次性帽子也是一个有效地防止污染的措施;
    (3)清洁工作及时、正确。实验工作结束后,必须立即对本区进行清洁。除常规的消毒液体对表面进行擦拭消毒或紫外线灯的照射消毒外,对一些实验设备还应进行高压消毒处理。

4.严格的管理
    (1)严格控制进出实验室的人员。与实验无关的人员不得随意进出实验室,有条件的情况下要设置独立的通道和进出整个实验区的门;
    (2)在各个实验区域使用带有明显区别标志的工作服(如不同颜色),当工作人员离开时不得将本区的工作服带至其它区域;
    (3)尽量减少在实验区内不必要的走动以减少交叉污染的可能性。
    (4)扩增产物分析区是主要的扩增产物污染来源,废液不能在实验室中倾倒,经消毒液浸泡消毒后在远离实验室的地方弃掉,用过的吸头等一次性材料也应经消毒液浸泡消毒后统一处理,如焚烧等;
    (5)扩增产物分析区可能会用到某些可致基因突变和有毒物质,应特别注意实验人员的安全防护。

5.完备的实验室配套设施
    完备的实验室配套设施是保证实验工作的必要条件,应根据各个实验室实验内容的不同配备相应的设备和仪器,如超净工作台、离心机、加样器等。
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